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什么是暗场显微镜技术?

2016-04-05技术资料

在生物学各个领域中,最常用的是普通常规正置光学显微镜,也称透射式明场显微镜。此外,根据不同的实验环境,生物显微镜衍生出了更为专业的研究用显微镜。它们是利用了光的物理学原理,根据实验研究的需求所研发出来的。一般比较常规的有暗场显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、相衬显微镜等等。


暗场显微镜是根据光的物理特性,利用斜射式照明法,即暗场照明法来进行照明。对被检物体,暗场照明法和普通明场照明方式所不同,它不直接观察到照明的光线,即光线不直接射入观察者的眼睛,而是接受到被检物体反射或者衍射的光线。因此整个视场呈黑暗状,而呈现出明亮的被检物体。 
下面以奥林巴斯暗场显微镜BX53举例说明。奥林巴斯BX53是一台多功能显微镜,平时它可作用为普通明场生物显微镜使用。因为暗场显微镜的结构与明场显微镜基本相同,只是采用的是暗场聚光镜。所以奥林巴斯BX53只需加配上专用奥林巴斯暗场聚光镜就能够成为观察暗场的研究设备。装上暗场聚光镜后,光线不能如明场显微镜一般自下而上的通过被检物体,而是改变了光的路径,使其斜射投向被检物体,使光线没有直接进入物镜,利用被检物体表面反射或衍射的光而形成的黑暗背景中的明亮图像。
如奥林巴斯BX53暗场显微镜所示,暗场显微技术的优越性在于能观察到明场下而观察不到的极其微小的物体。但是,暗场显微镜也有一定的缺点,其只能观察到物体的存在、运动及外部形态,而很难分辨其内部结构。所以在应用暗场显微镜进行暗场镜检时,首先必须调整好光轴,研究用暗场显微镜的照明也可以为科勒照明,但是必须是强光,特别对于高倍物镜更是如此。
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